siRNA,shRNA,dsRNA,miRNA間的區別
RNA干擾(RNAi),即用20多個(gè)核苷酸組成的短的雙鏈RNA(siRNA)代替傳統反義核酸進(jìn)行轉錄后基因沉默,已經(jīng)迅速而廣泛地應用到基因功能,基因表達調控機制研究等熱門(mén)領(lǐng)域,并為基因治療開(kāi)辟了新的途徑。近兩年來(lái),這方面的科學(xué)論文及報道爆炸性增長(cháng),幾乎每天都有新的結果涌現。這些論文中,出現了很多與RNA干擾相關(guān)的概念,意思很相近但并不*相同,這里列舉了幾個(gè)常見(jiàn)的RNA干擾相關(guān)的名詞及其簡(jiǎn)單的解釋?zhuān)?/span>
1、 miRNA:在遺傳學(xué)中,微RNA(microRNAs,miRNA)是長(cháng)度在21-23個(gè)核苷酸之間的單鏈RNA pian段,調節基因的表達。miRNA由基因編碼,從DNA轉錄而來(lái),但不翻譯成蛋白。初級轉錄產(chǎn)物(primary transcripts,pri-miRNA)縮短其頸環(huán)結構得到功能性的miRNA。成熟的miRNA分子與一個(gè)或geng多個(gè)mRNA分子部分互補,其主要功能是下調基因的表達。而microRNA這個(gè)概念di一次在2001年Science (26 October 2001)的文章中出現。
2、 dsRNA:雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)是一種有互補鏈的RNA,與細胞中發(fā)現的DNA相似,dsRNA構成了一些病毒(雙鏈RNA病毒)的基因組。像病毒RNA或siRNA之類(lèi)的雙鏈RNA能夠促發(fā)真核細胞中的RNA干擾,引起脊椎動(dòng)物中的干擾素反應。
3、 shRNA:小發(fā)卡或短發(fā)卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA)是一段具有緊密發(fā)卡環(huán)(tight hairpin turn)的RNA序列,常被用于RNA干擾沉默靶基因的表達。利用載體把shRNA導入細胞,載體中的U6 啟動(dòng)子確保shRNA總是表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默可被遺傳。shRNA的發(fā)卡結構可被細胞機制切割成siRNA,然后siRNA結合到RNA誘導沉默復合物上(RNA-induced silencing complex,RISC),該復合物能夠結合到目的mRNAs并將其降解。shRNA 是由RNA 聚合酶Ⅲ轉錄的,哺乳細胞中的shRNA產(chǎn)物有時(shí)會(huì )促使細胞產(chǎn)生干擾素反應(細胞遇到病毒侵襲時(shí)做出的自我防衛反應),而miRNA中卻不會(huì )遇到這種問(wèn)題(miRNA是由RNA聚合酶Ⅱ轉錄,與轉錄mRNA的聚合酶相同)。shRNA也被用于植物和其它系統中,在這些系統中不需要U6啟動(dòng)子的驅動(dòng)。在植物中,常用的增強表達的啟動(dòng)子是CaMV35S(cauliflower mosaic virus 35S),在這種情況下,RNA聚合酶Ⅱ參與了轉錄,起始RNA干擾。
4、 siRNA:小或短干擾RNA(small/short interfering RNA, siRNA)是一類(lèi)20-25個(gè)核苷酸長(cháng)度的雙鏈RNA分子,其主要在RNAi通路中起作用,干擾特異基因的表達。此外siRNA在RNAi相關(guān)的通路中也起作用,如抗病毒機制,基因組染色體結構的塑造等。其結構是一段*互補的RNA雙鏈,兩端各有兩個(gè)未互補的的堿基。
end:做一下小結,miRNA,siRNA,dsRNA和shRNA都是RNA干擾技術(shù)中用到的小分子RNA,其不同之處在miRNA 是單鏈RNA,其余均為雙鏈RNA;siRNA和dsRNA相似;shRNA需通過(guò)載體導入細胞后,然后利用細胞內的酶切機制得到siRNA而終發(fā)揮RNA干擾作用。
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